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郑州地区奶牛全血中微量元素铜、锌的含量与其不孕症关系的研究

[导读]为研究奶牛全血中微量元素铜和锌含量与奶牛不孕症的关系, 以郑州地区某奶牛小区的45 头奶牛作为实验动物, 无菌法颈静脉采血3~5ml 作为待测样品, 经湿法消化后, 采用原子吸收分光光度法测定其中的微量元素铜和锌的含量。

不孕不育症是奶牛的一种常见疾病, 我国奶牛的发病率在30%~40%。据在郑州地区调查, 奶牛繁殖障碍疾病的发病率可达10%, 其中胎衣不下就可达15%~25%, 严重者可达40%。奶牛不孕症与微量元素有密切关系,微量元素参与酶、激素、维生素的代谢, 影响哺乳动物的生殖功能。缺锌可影响卵母细胞的成熟, 即在中期卵母细胞中, 退化的卵母细胞数量比正常的增加一倍, 且卵母细胞形态异常的数目增加。准确检测微量元素在奶牛体中的含量是兽医学研究与临床应用的前提和基础。本实验采用原子吸收分光光度法测定了郑州地区45头奶牛的全血, 以此来了解奶牛不孕症与其全血中微量元素铜、锌的关系。通过对测定结果比较分析, 得出不同年龄阶段, 奶牛全血中微量元素铜、锌的含量不同, 对奶牛不孕症有一定的影响, 但影响不显著; 微量元素铜与锌相比, 铜对奶牛不孕症的影响相对较大。
一 、材料与方法
( 一) 试验材料
郑州地区某奶牛小区45 头奶牛,颈静脉无菌采血3~5ml/头, 肝素钠抗凝, 于-20℃冰箱冻存。
( 二) 试验器材与试剂
Z—5000原子吸收分光光度计、可调式电炉、分析天平、干燥箱、SIGMA高速冷冻离心机、微量移液抢10ml、50ml容量瓶若干、凯式定氮瓶若干、冰箱。
浓硝酸、浓盐酸、高氯酸均为优级纯、铜粉( 99.99%) 、锌粉( 99.99%) 、铁粉( 99.99%) 均为光谱纯、试验所用水均为三蒸水。
( 三) 试验程序和方法
1、试验样品。将不同奶牛3~5ml血液样品于-20℃冷冻保存48h后, 取出, 令其在室温溶解, 然后在SIGMA高速冷冻离心机下3000 转/min 离心5min。于-20℃冷冻保存以备用。
2、样品预处理。采用湿法消化法处理样品, 准确量取0.50ml样品( 移前先将全血样品充分摇匀) , 移入凯式定氮瓶中。然后再移取浓硝酸、浓高氯酸各2ml于凯氏定氮瓶中, 置于可调式电炉加热硝化直至溶液清亮。然后取出凯氏定氮瓶, 冷却后, 移入50ml容量瓶中。用三蒸水洗涤凯氏定氮瓶数次, 洗液并入容量瓶, 加水至刻度线,混匀备用, 同时作试剂空白对照。
3、标准溶液的制备和储存。铜标准溶液的制备和储存: 储存溶液浓度1000μg/ml。称取99.99% 金属铜0.050g, 置于凯氏定氮瓶中, 加硝酸( 1∶1) 10ml, 加热至完全溶解, 蒸至小体积, 冷却, 加硝酸2.5ml, 加水煮沸溶解盐类, 冷却后移入50ml容量瓶中并稀释至刻度, 摇匀备用。
锌标准溶液的制备和储存: 储存溶液浓度1000μg/ml。准确称取99.99%金属锌0.050g, 置于凯氏定氮瓶中, 加盐酸10ml, 加热使其溶解完全, 蒸至小体积, 冷却, 加入盐酸2.5ml, 加水煮沸溶解盐类, 冷却后移入50ml容量瓶中, 稀释至刻度, 摇匀备用。
4、标准曲线的绘制。铜、锌标准曲线方程和相关系数见表1。铜的标准曲线见图1。

不孕不育症是奶牛的一种常见疾病, 我国奶牛的发病率在30%~40%。据在郑州地区调查, 奶牛繁殖障碍疾病的发病率可达10%, 其中胎衣不下就可达15%~25%, 严重者可达40%。奶牛不孕症与微量元素有密切关系,微量元素参与酶、激素、维生素的代谢, 影响哺乳动物的生殖功能。缺锌可影响卵母细胞的成熟, 即在中期卵母细胞中, 退化的卵母细胞数量比正常的增加一倍, 且卵母细胞形态异常的数目增加。准确检测微量元素在奶牛体中的含量是兽医学研究与临床应用的前提和基础。本实验采用原子吸收分光光度法测定了郑州地区45头奶牛的全血, 以此来了解奶牛不孕症与其全血中微量元素铜、锌的关系。通过对测定结果比较分析, 得出不同年龄阶段, 奶牛全血中微量元素铜、锌的含量不同, 对奶牛不孕症有一定的影响, 但影响不显著; 微量元素铜与锌相比, 铜对奶牛不孕症的影响相对较大。
一 、材料与方法
( 一) 试验材料
郑州地区某奶牛小区45 头奶牛,颈静脉无菌采血3~5ml/头, 肝素钠抗凝, 于-20℃冰箱冻存。
( 二) 试验器材与试剂
Z—5000原子吸收分光光度计、可调式电炉、分析天平、干燥箱、SIGMA高速冷冻离心机、微量移液抢10ml、50ml容量瓶若干、凯式定氮瓶若干、冰箱。
浓硝酸、浓盐酸、高氯酸均为优级纯、铜粉( 99.99%) 、锌粉( 99.99%) 、铁粉( 99.99%) 均为光谱纯、试验所用水均为三蒸水。
( 三) 试验程序和方法
1、试验样品。将不同奶牛3~5ml血液样品于-20℃冷冻保存48h后, 取出, 令其在室温溶解, 然后在SIGMA高速冷冻离心机下3000 转/min 离心5min。于-20℃冷冻保存以备用。
2、样品预处理。采用湿法消化法
处理样品, 准确量取0.50ml样品( 移前先将全血样品充分摇匀) , 移入凯式定氮瓶中。然后再移取浓硝酸、浓高氯酸各2ml于凯氏定氮瓶中, 置于可调式电炉加热硝化直至溶液清亮。然后取出凯氏定氮瓶, 冷却后, 移入50ml容量瓶中。用三蒸水洗涤凯氏定氮瓶数次, 洗液并入容量瓶, 加水至刻度线,混匀备用, 同时作试剂空白对照。
3、标准溶液的制备和储存。铜标准溶液的制备和储存: 储存溶液浓度1000μg/ml。称取99.99% 金属铜0.050g, 置于凯氏定氮瓶中, 加硝酸( 1∶1) 10ml, 加热至完全溶解, 蒸至小体积, 冷却, 加硝酸2.5ml, 加水煮沸溶解盐类, 冷却后移入50ml容量瓶中并稀释至刻度, 摇匀备用。
锌标准溶液的制备和储存: 储存溶液浓度1000μg/ml。准确称取99.99%金属锌0.050g, 置于凯氏定氮瓶中, 加盐酸10ml, 加热使其溶解完全, 蒸至小体积, 冷却, 加入盐酸2.5ml, 加水煮沸溶解盐类, 冷却后移入50ml容量瓶中, 稀释至刻度, 摇匀备用。
4、标准曲线的绘制。铜、锌标准曲线方程和相关系数见表1。铜的标准曲线见图1。

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