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酶联免疫吸附(ELISA)法在食品微生物检测中的应用分析

[导读]ELISA是以免疫酶技术为基础发展起来的一种新的免疫测定技术,其作用机制是先使抗原或抗体和某种固相载体相结合形成抗原或抗体复合物,结合过程尽量维持抗原或抗体的活性,而后使其和某种酶结合,检测时,联合使用洗涤方法使抗原或抗体复合物和标本内被检物质形成某一比例关系,添加至适量酶反应底物后,便能出现有色产物]。将ELISA法用于食品微生物检测领域,对提升食品安全标准具有很大现实意义。

在长期的研究中构建了逆向直接竞争ELISA法去测定黄曲霉毒素B1(AFB1)后[7],相继构建了直接竞争、间接竞争及生物素-亲合素ELISA(BA-ELISA)方法检测食品内的AFB1含量,并对比了以上4种方法的应用情况。结果发现直接及间接竞争ELISA法在敏感度、特异性、简洁性、快捷性、可靠性及经济性等方面均占优势,在我国基层领域可以逐步推广应用。路戈等利用单克隆抗体构建了用于检测玉米、大米、植物油等食品内AFB1的ELISA间接竞争法[8],统计发现该法的检出浓度最低值是0.01 ng/g,敏感区间0.2~50 ng/g,回收率均值83.0%~110.3%,精密度2.0%~24.3%。选择分布在淮河以北地区的1 455份样本为试验对象,采用以上技术方法进行检测,并择选出25份植物油样品,采用TIC与ELISA法分别检测,并进行比较分析,发现在ELISA法灵敏度(5 ng/L)之下时,TIC法都不能将AFB1检测出来,ELISA法对其的检出率能达到96%,灵敏度显著优于TIC法

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